Insulin/IGF-I rescues immortalized brown adipocytes from apoptosis down-regulating Bcl-xS expression, in a PI 3-kinase- and map kinase-dependent manner

Abstract

La privación de suero en una línea celular inmortalizada de adipocitos pardos dio lugar a una detención del crecimiento en las fases G0/G1 del ciclo celular y a apoptosis, detectada tanto mediante el patrón de fragmentación del ADN (DNA laddering) como por el aumento en el porcentaje de células hipodiploides. Además, la apoptosis se acompañó de un incremento drástico en la expresión de la proteína proapoptótica Bcl-xS, mientras que la expresión de Bcl-xL permaneció prácticamente indetectable. La insulina/factor de crecimiento similar a la insulina tipo I (IGF-I) rescató a los adipocitos pardos privados de suero de la apoptosis, disminuyendo el número de células hipodiploides y aumentando el número de células que progresaban a través de las fases S y G2/M del ciclo celular. Asimismo, la insulina redujo la expresión de Bcl-xS sin inducir la expresión de Bcl-xL. Tanto la vía de la fosfatidilinositol (PI) 3-quinasa como la vía de la proteína quinasa activada por mitógenos (MAPK) son necesarias para el efecto completo de supervivencia mediado por insulina/IGF-I, ya que el uso de inhibidores específicos de la actividad PI 3-quinasa (wortmanina o LY294002, a la dosis que inhibe la actividad de PI 3-quinasa inducida por insulina) o del inhibidor de la quinasa de MAPK (PD098059, a la dosis que inhibe la fosforilación de MAPK inducida por insulina) bloqueó totalmente el efecto antiapoptótico inducido por insulina/IGF-I. En conclusión, el efecto de supervivencia de la insulina sobre adipocitos pardos inmortalizados se asocia con la inhibición del contenido de Bcl-xS sin modificar Bcl-xL, de manera dependiente de las vías PI 3-quinasa y MAP quinasa.